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如何在眼表疾病临床诊治中运用印迹细胞学检查?

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如何在眼表疾病临床诊治中运用印迹细胞学检查?

发布日期:2013-09-27
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   如何在眼表疾病临床诊治中运用印迹细胞学检查?

   印迹细胞学(Impression cytology,IC)是一种用醋酸纤维滤膜印取眼表上皮并对细胞的形态特征进行细胞学检查,分析整个眼表面上皮细胞病理学改变的方法。

   人结膜杯状细胞的密度在鼻侧睑结膜最高,在颞侧睑结膜、穹隆部球结膜、睑裂部球结膜依次递减。评估光镜下的IC标本,通常采用Nelson’s分级观察下列指标:①上皮细胞的质量,如细胞的大小和形状,即鳞状化生的程度、核浆比(N/C)、上皮细胞的区域等;②杯状细胞的密度、形状和PAS染色的程度等;③非上皮细胞的出现,如炎性细胞、病原微生物等。除了在光镜下观察IC标本,还可以结合免疫组织化学、多聚酶链反应(PCR)、流式细胞学、免疫凝胶电泳、Western blot分析等方法对标本进行进一步的研究。

   结膜的印迹细胞学检查属于病理形态学诊断,对于杯状细胞缺乏型干眼病的诊断为金标准,干眼病患者结膜上皮细胞体积明显扩大、扁平化,核固缩,核中出现“蛇样染色质”,偶可见到杆状核细胞,杯状细胞消失。正常角膜上皮的稳定取决于健康角膜缘干细胞的持续分化作用,IC检查可明确角膜区是否有结膜上皮侵入及其是否含有杯状细胞生长,由此有助于判断角膜干细胞缺乏的程度和部位。在角膜IC标本上进行细胞角蛋白CK19和CK3的阳性染色,是诊断角膜缘干细胞缺乏比较简单可行的方法。眼表感染性疾病的病原体的早期诊断有助于临床积极治疗。IC方法能够获得大量的眼表细胞,包括被感染的细胞以及病原微生物,并且快速、简便、敏感性高,从结膜和角膜上取下的IC标本经培养,能生长出棘阿米巴滋养体,透明滤膜取得大量结膜细胞标本,直接对其进行病毒抗原的免疫荧光染色,可以在1-4小时内快速诊断眼表的单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒及腺病毒感染。

  此外,眼表新生物也能通过IC检查获得表层细胞的病理活检,检查简单易行,可作为眼表不明新生物的筛查。IC研究已表明滴眼液中的防腐剂氯化苄烷胺能诱发结膜鳞状化生、杯状细胞减少及粘蛋白分泌异常等改变,为临床研究眼表药物对角结膜的影响提供有力的证据。

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